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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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BL21 Star(DE3) 感受態細胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-G63270
  • 發布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2025-04-27
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63270
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規格 100ul*10 100ul*50
純度 %
是否進口
規格參數:

產品名稱:BL21 Star(DE3) 感受態細胞
規格 :100ul*10 100ul*50
分類:表達感受態細胞
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。
操作方法:
1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide   大鼠角化細胞因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA檢測試劑盒Ratkeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 96T/48T  Humangranulocytechemotacticprotein-2,GCP-2ELISA試劑盒人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒規格:96T/48T

外消旋2-羥基布洛芬質量規格:美國進口rac 2-Hydroxy Ibuprofen  SHC轉化蛋白1(SHC1)試劑盒 Human SHC1 ELISA Kit  HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAKit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒規格:96T/48T

1-羥基布洛芬(布洛芬雜質))(非對映)質量規格:美國進口1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers)  英文名稱MouseVIII-AgELISAKit小鼠凝血因子VIII相關抗原(VIII-Ag)規格:96T/48T  大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA試劑盒 ,英文名: REG-1a ELISA Kit

1-含氧的布洛芬質量規格:美國進口1-Oxo Ibuprofen  VZV(VARICELLAZOSTER)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2  人酶(CA)ELISA檢測試劑盒Humancarbonicanhydrase,CAELISAKit 96T/48T

犬緊張素1-7(Ang1-7)試劑盒 Dog angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit  502-65-8番茄紅素說明書  lycopene

英文名稱HumaissuefactorpathwayinhibitorELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規格:96T/48T  81-27-6番瀉苷A品牌  Sennoside A

超敏型ECL印跡化學發光溶液A液:100毫升B液:500微升1000cm2  128-57-4番瀉苷B規格  Sennoside B

Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISA試劑盒大鼠糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規格:96T/48T  37271-16-2番瀉苷C  Sennoside C

小鼠轉錄激活因子6(ATF6)ELISA試劑盒 ,英文名: ATF6 ELISA Kit  37271-17-3番瀉苷D說明書  Sennoside D

6537-80-0菊苣酸品牌  Cichoric Acid   組蛋白H3-K18(mono)甲基化檢測試劑盒10/20

65-19-0鹽酸育亨賓品牌   Yohimbine   組蛋白H3-K14乙酰化檢測試劑盒10/20

BL21 Star(DE3) 感受態細胞64-86-8秋水仙堿說明書    Colchicine  組蛋白H3-K122(mono)甲基化檢測試劑盒10/20

64849-39-4甜葉懸鉤子苷說明書  Rubusoside  組蛋白H2B-K5乙酰化檢測試劑盒10/20

64849-39-4甜茶苷說明書  Rubusoside   組蛋白H2B-K46乙酰化檢測試劑盒10/20

聯系方式
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