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| 產(chǎn)地 | 科研 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | AE0788 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 骨髓瘤 |
| 細胞形態(tài) | 半貼壁 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | 小鼠 |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠細胞直銷
簡稱：NS-1
種屬：小鼠
來源：
培養(yǎng)基：IMDM
狀態(tài)：半貼壁
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號：AE0788
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細胞小鼠細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
中分子量標準蛋白，英文名或英文縮寫：Middle range protein MW marker，級別：BR，100u/mg，規(guī)格：100克 Ratbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISA試劑盒大鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
12650-88-3溶菌酶LysozyMe froM chicken egg white BioCheMika humancolicinELISA試劑盒人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
AZUREB天青B高純級深綠色/紫色粉末RTsigma Humanerythropoiesisstimulatingfactor,ESFELISAKit人紅細胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2--5- 2-Chloro-5-fluoro,98% 84194-30-9 5G 通用試劑 牛金屬硫蛋白(MT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
銨/铔/硫銨/硫/Ammonium sulfate AR，99% 500克 國產(chǎn)/進口 人轉化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒 Human ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit
吐溫65100克 人癌標志物-CA153ELISAKit人癌標志物-CA153ELISAKit，48T/96T人癌標志物-CA153ELISAKit，48T/96T規(guī)格：48T/96T
94-75-72,4-二錄本氧基乙酸2,4-Dichloropxenoxyacetic acid 小鼠白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鹽培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克 Human dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 人脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA試劑盒
2-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8 Humanglucokinase,GCKELISAKit 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
扶化鋁鉀，英文名或英文縮寫：potewwium fluoaluminate，級別：BR，97%，規(guī)格：100克 HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISA試劑盒人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
諾納德P40500克 細菌氧化酶定性檢測試劑盒20次
73049-73-7胰蛋白胨;胰化蛋白胨Tryptone RabbitGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit兔粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硫檸膽蔗瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：500毫升 豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
DL-高苯酸 DL-Homophenylalanine 1012-05-1 1G 通用試劑 Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒
異炳基-beta-D-流代半乳糖糖苷 IPTG,Dioxcnq-Frqq 367-93-1 HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
小鼠細胞直銷甲基庚基甲酮，英文名或英文縮寫：2-Nonanone，級別：色標，99.5%，規(guī)格：1克 CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β內(nèi)啡肽受體規(guī)格：48T/96T
AmmoniumPersulfate 50g/100g Sigma分裝 細菌鹽肉湯500毫升
3,3-Dimetxylallylbromide4-溴-2--2-丁烷25克BR RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
膠原蛋柏 Type II(2-8°C) Collcgqns polypqptidq 9007-34-2 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
ProteinprotectantTY蛋白保護劑TY1克生物技術級，200u/mg Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
